Антинуклеарные антитела¶

Антинуклеарные антитела (АНА, антинуклеарный фактор) — это группа аутоантител, направленных против компонентов собственного клеточного ядра и некоторых цитоплазматических структур. Они вырабатываются иммунной системой при утрате толерантности к собственным антигенам и являются ключевым серологическим маркером системных аутоиммунных ревматических заболеваний, прежде всего системной красной волчанки (СКВ). Выявление АНА лежит в основе лабораторной диагностики диффузных болезней соединительной ткани.

¶История открытия

Феномен антинуклеарных антител был впервые описан в 1948 году Малкольмом Харгрейвсом и его коллегами при изучении костного мозга пациентов с системной красной волчанкой. Исследователи обнаружили клетки, поглощающие ядра других клеток, — так называемые LE-клетки (клетки красной волчанки). В 1957 году были открыты антитела к нативной ДНК, а в 1961 году Джордж Фриу разработал метод непрямой иммунофлюоресценции на криостатных срезах печени крысы, позволивший визуализировать АНА. Позднее в качестве субстрата стали использовать клеточную линию HEp-2 (клетки карциномы гортани человека), что повысило чувствительность и стандартизировало методику.

¶Классификация и виды

АНА представляют собой гетерогенную группу иммуноглобулинов, различающихся по антигенной специфичности. В зависимости от мишени выделяют несколько основных типов.

¶Антитела к ДНК

Антитела к двуспиральной (нативной) ДНК (анти-дсДНК) высокоспецифичны для системной красной волчанки и коррелируют с активностью заболевания, особенно с поражением почек (люпус-нефритом). Антитела к односпиральной ДНК менее специфичны и встречаются при других ревматических патологиях.

¶Антитела к гистонам

Антитела к белкам-гистонам (анти-H) обнаруживаются при лекарственной волчанке (в 95% случаев), а также при идиопатической СКВ (у 30–50% пациентов). Они направлены против комплексов гистонов с ДНК.

¶Антитела к экстрагируемым ядерным антигенам

Эта группа включает антитела к рибонуклеопротеинам и негистоновым белкам. К ним относятся анти-Sm (Смит-антиген), анти-RNP, анти-Ro/SSA и анти-La/SSB. Антитела к Sm высокоспецифичны для СКВ, анти-RNP характерны для смешанного заболевания соединительной ткани, анти-Ro/SSA и анти-La/SSB ассоциированы с синдромом Шёгрена и волчанкой новорождённых.

¶Антинуклеолярные антитела

Антитела к компонентам ядрышка (фибрилларину, РНК-полимеразе I) встречаются при системной склеродермии. Они дают характерное крупногранулярное или точечное свечение ядрышек при иммунофлюоресценции.

¶Методы выявления

Основным скрининговым методом остаётся непрямая иммунофлюоресценция на клетках HEp-2. Этот метод позволяет не только подтвердить наличие АНА, но и определить тип свечения (титр), который коррелирует с антигенной специфичностью. Различают гомогенный, периферический (кольцевой), гранулярный (зернистый), нуклеолярный и центромерный типы свечения. Гомогенное свечение характерно для антител к ДНК и гистонам, гранулярное — для анти-RNP и анти-Sm, центромерное — для ограниченной формы склеродермии (CREST-синдрома).

Для уточнения специфичности применяют иммуноферментный анализ (ИФА), иммуноблоттинг и иммунопреципитацию. Эти методы позволяют дифференцировать отдельные антитела в сыворотке пациента. Результат выражается в титре (например, 1:160) и концентрации (международные единицы на миллилитр).

¶Клиническое значение

Положительный результат теста на АНА имеет значение только в сочетании с клинической картиной. У здоровых людей низкие титры АНА (до 1:80–1:160) встречаются в 5–15% случаев, чаще у женщин и пожилых лиц. Диагностически значимым считается титр 1:320 и выше при наличии симптомов аутоиммунного заболевания.

¶Системная красная волчанка

При СКВ АНА обнаруживаются у 95–98% пациентов, поэтому отрицательный результат делает этот диагноз маловероятным. Высокие титры анти-дсДНК и анти-Sm подтверждают диагноз. АНА входят в классификационные критерии СКВ Американской коллегии ревматологов (ACR) и Европейской лиги против ревматизма (EULAR).

¶Другие заболевания

АНА выявляются при системной склеродермии (85–90%), синдроме Шёгрена (70–80%), смешанном заболевании соединительной ткани (100%), дерматомиозите (60–80%), а также при ювенильном идиопатическом артрите, аутоиммунном гепатите и некоторых других состояниях. При лекарственной волчанке АНА направлены преимущественно к гистонам.

¶Норма и интерпретация

Референсные значения зависят от метода и лаборатории. При иммунофлюоресценции нормой считается титр менее 1:80. Однако отсутствие АНА не исключает системное аутоиммунное заболевание, особенно при ограниченных формах патологии. Ложноположительные результаты возможны при инфекциях (вирусный гепатит, туберкулёз), онкологических заболеваниях и на фоне приёма некоторых лекарственных препаратов (прокаинамид, гидралазин, изониазид).

¶Ограничения метода

Тест на АНА не является специфичным для отдельного заболевания, поэтому для постановки диагноза требуется определение конкретных антинуклеарных специфичностей и сопоставление с клинической картиной. Диагностическая ценность теста повышается при динамическом наблюдении: нарастание титра анти-дсДНК может предшествовать обострению волчаночного нефрита.