Проба с флюоресцеином

Проба с флюоресцеином — это диагностический метод офтальмологии, основанный на использовании флуоресцентного красителя (флюоресцеина натрия) для визуализации повреждений роговицы, оценки состояния слезной пленки и проходимости слезоотводящих путей. Процедура заключается в закапывании раствора красителя в конъюнктивальную полость с последующим осмотром глаза в кобальтово-синем свете щелевой лампы. Метод позволяет выявлять микроэрозии, инородные тела, язвы, а также диагностировать синдром «сухого глаза» и нарушения оттока слезы.

История

Впервые флюоресцеин был синтезирован в 1871 году немецким химиком Адольфом фон Байером. Однако его применение в офтальмологии началось значительно позже. В 1882 году австрийский врач Эрнст Фукс впервые использовал раствор флюоресцеина для окрашивания роговицы с целью выявления дефектов эпителия. Метод получил широкое распространение в первой половине XX века после внедрения щелевой лампы (биомикроскопа), которая позволила наблюдать флюоресценцию в контролируемых условиях. В 1960-х годах процедура была стандартизирована для диагностики синдрома «сухого глаза» (тест Норна) и оценки времени разрыва слезной пленки.

Физико-химические основы

Флюоресцеин натрия (C₂₀H₁₀Na₂O₅) — это органическое соединение, относящееся к классу ксантеновых красителей. При попадании на поврежденную роговицу он проникает в межклеточное пространство эпителия и связывается с белками стромы, что приводит к интенсивному зеленому свечению под воздействием света с длиной волны 465–490 нм (кобальтово-синий фильтр). Максимум эмиссии флюоресценции приходится на 520–530 нм (желто-зеленый спектр). Неповрежденный эпителий роговицы не пропускает краситель, поэтому здоровые участки остаются неокрашенными.

Методика проведения

Подготовка

Перед процедурой пациенту снимают контактные линзы (если они используются). Раствор флюоресцеина натрия (обычно 0,25–2% концентрации) закапывают в нижний конъюнктивальный свод одного или обоих глаз. Альтернативно используют стерильные флюоресцеиновые полоски, которые смачивают физиологическим раствором и прикладывают к конъюнктиве.

Осмотр

Осмотр проводят через 1–2 минуты после инстилляции. Пациент помещает подбородок на подставку щелевой лампы. Врач включает кобальтово-синий фильтр и наблюдает за распределением красителя. При необходимости оценивают время разрыва слезной пленки (тест Норна): пациента просят не моргать, а затем фиксируют время появления первых сухих пятен на роговице.

Завершение

Избыток красителя удаляют промыванием конъюнктивальной полости физиологическим раствором. Результаты фиксируются в виде описания или схематического рисунка.

Диагностические возможности

Выявление повреждений роговицы

Флюоресцеин окрашивает участки с нарушенной целостностью эпителия: эрозии, царапины, язвы, кератиты, а также места внедрения инородных тел. Цвет и интенсивность окрашивания могут указывать на глубину поражения: поверхностные дефекты дают ярко-зеленое свечение, глубокие — более тусклое.

Оценка слезной пленки

Тест Норна (время разрыва слезной пленки) позволяет диагностировать синдром «сухого глаза». В норме разрыв происходит не ранее чем через 10 секунд. Укорочение времени (менее 5 секунд) свидетельствует о нестабильности слезной пленки.

Проверка проходимости слезоотводящих путей

Проба с флюоресцеином (тест Веста) используется для оценки функции носослезного канала. После закапывания красителя в глаз пациента просят высморкаться в салфетку. Если краситель появляется на салфетке, проходимость считается сохранной. Отсутствие окрашивания указывает на обструкцию.

Диагностика кератоконуса

При кератоконусе (конусовидной деформации роговицы) флюоресцеин может выявлять характерное кольцевидное окрашивание вокруг вершины конуса, что связано с истончением эпителия.

Показания и противопоказания

Показания

• Подозрение на травму роговицы (эрозии, инородные тела).
• Диагностика инфекционных кератитов (бактериальных, вирусных, грибковых).
• Оценка состояния слезной пленки при синдроме «сухого глаза».
• Контроль заживления после кератопластики или лазерной коррекции зрения.
• Проверка проходимости слезоотводящих путей.
• Диагностика кератоконуса и других дистрофий роговицы.

Противопоказания

• Аллергическая реакция на флюоресцеин (крайне редка, но возможна).
• Беременность и период лактации (относительное противопоказание, применяется с осторожностью).
• Открытые раны глазного яблока (возможно усиление воспаления).

Осложнения и побочные эффекты

• Временное окрашивание кожи век и слезной жидкости в желтый цвет (исчезает в течение нескольких часов).
• Чувство жжения или дискомфорта сразу после закапывания (проходит самостоятельно).
• В редких случаях — аллергический конъюнктивит или отек век.
• При использовании нестерильных растворов — риск инфицирования.

Альтернативные методы

• Лиссаминовый зеленый — краситель, который лучше окрашивает мертвые клетки конъюнктивы, но хуже выявляет дефекты роговицы.
• Розовый бенгальский (бенгальский розовый) — используется для диагностики ксероза (сухости) конъюнктивы, но вызывает более выраженное жжение.
• Флюоресцеиновая ангиография — метод визуализации сосудов сетчатки с внутривенным введением красителя, не применяется для диагностики роговицы.

Интересные факты

• Флюоресцеин используется не только в офтальмологии, но и в гидрологии для маркировки водных потоков, а также в криминалистике для выявления следов крови.
• В некоторых странах флюоресцеин добавляют в антифризы для обнаружения утечек охлаждающей жидкости в автомобилях.
• Первое описание окрашивания роговицы флюоресцеином у человека было сделано в 1882 году, но метод не получил широкого применения до 1920-х годов, когда были разработаны первые щелевые лампы.

Источники

• Офтальмология: национальное руководство / под ред. С. Э. Аветисова, Е. А. Егорова, Л. К. Мошетовой. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2019.
• Кански Д. Клиническая офтальмология: систематизированный подход. — М.: Логосфера, 2018.
• Норн М. С. Fluorescein and the diagnosis of dry eye // Acta Ophthalmologica. — 1969. — Vol. 47, № 4.
• Вест С. Тест проходимости слезных путей // Вестник офтальмологии. — 1954. — № 3.