Буккальный эпителий¶

Буккальный эпителий — это многослойный плоский неороговевающий эпителий, выстилающий внутреннюю поверхность щёк (лат. bucca — щека). Относится к слизистой оболочке ротовой полости и выполняет барьерную, защитную и рецепторную функции. Благодаря лёгкой доступности для забора материала и высокой скорости обновления клеток, буккальный эпителий широко используется в цитологических, генетических и токсикологических исследованиях.

¶Строение и гистология

Буккальный эпителий представляет собой многослойный плоский эпителий, который, в отличие от эпителия дёсен и твёрдого нёба, не подвергается ороговению. Его толщина варьируется от 200 до 500 мкм. Эпителий состоит из нескольких слоёв клеток, расположенных на базальной мембране, которая отделяет его от подлежащей соединительной ткани (собственной пластинки слизистой оболочки).

¶Слои эпителия

1. Базальный слой — самый глубокий, прилегает к базальной мембране. Состоит из одного ряда кубических или призматических клеток с крупными ядрами. В этом слое происходит активное деление клеток (митоз), обеспечивающее обновление эпителия. Клетки базального слоя содержат стволовые элементы и кератиноциты.
2. Шиповатый слой — состоит из нескольких рядов полигональных клеток, соединённых между собой многочисленными десмосомами. При микроскопии эти соединения выглядят как «шипики», что дало название слою. Клетки содержат тонофиламенты (предшественники кератина).
3. Промежуточный слой — клетки уплощаются, их ядра становятся более вытянутыми. Цитоплазма содержит гранулы гликогена и липидов.
4. Поверхностный слой — состоит из 2–3 рядов плоских клеток, которые постепенно слущиваются. В отличие от ороговевающего эпителия, ядра в этих клетках сохраняются (хотя могут быть пикнотичными), а полного ороговения не происходит.

¶Клеточный состав

Основную массу буккального эпителия составляют кератиноциты (до 90%). Кроме них, в эпителии присутствуют:

• Меланоциты — пигментные клетки, расположенные в базальном слое.
• Клетки Лангерганса (внутриэпителиальные макрофаги) — участвуют в иммунном ответе, находятся преимущественно в шиповатом слое.
• Клетки Меркеля — осязательные рецепторы, связанные с нервными окончаниями.

¶Функции

Буккальный эпителий выполняет несколько ключевых функций:

• Барьерная — защищает подлежащие ткани от механических повреждений, химических раздражителей и проникновения микроорганизмов. Плотные межклеточные контакты (десмосомы) и непрерывное обновление клеток обеспечивают целостность барьера.
• Защитная — участвует в местном иммунитете: клетки Лангерганса захватывают и представляют антигены, а кератиноциты секретируют антимикробные пептиды (дефенсины, кателицидины).
• Рецепторная — содержит тактильные, температурные и болевые рецепторы (свободные нервные окончания и тельца Мейснера).
• Секреторная — клетки эпителия выделяют муциноподобные вещества, которые увлажняют поверхность слизистой и способствуют скольжению пищи.
• Участие в регенерации — благодаря высокой митотической активности базального слоя полное обновление буккального эпителия происходит каждые 5–14 суток, что обеспечивает быстрое заживление микротравм.

¶Регенерация и обновление

Буккальный эпителий обладает одной из самых высоких скоростей обновления среди тканей организма. Время полного обновления (время миграции клетки от базального слоя до слущивания) составляет от 5 до 14 дней. Процесс регенерации регулируется факторами роста (эпидермальный фактор роста, трансформирующий фактор роста альфа) и цитокинами. При повреждении (например, при ожоге или травме) скорость деления клеток базального слоя резко возрастает, что обеспечивает быстрое заживление без образования рубцов (в отличие от кожи).

¶Применение в исследованиях

Буккальный эпителий является ценным материалом для различных биомедицинских исследований благодаря неинвазивности забора (соскоб или смыв со щеки), безболезненности и высокой клеточной насыщенности.

¶Цитологические исследования

Мазки буккального эпителия используются для скрининга предраковых и раковых заболеваний слизистой оболочки рта. При микроскопии оценивают морфологию клеток, размер и форму ядер, наличие атипичных клеток. Также метод применяется для диагностики вирусных инфекций (например, вируса папилломы человека, герпеса).

¶Генетические исследования

Клетки буккального эпителия являются одним из основных источников ДНК для генетического анализа. Метод используется для:

• идентификации личности (судебно-медицинская экспертиза);
• диагностики наследственных заболеваний (муковисцидоз, фенилкетонурия);
• определения пола и хромосомных аномалий (например, синдром Шерешевского — Тёрнера);
• фармакогенетических исследований (выявление полиморфизмов генов, влияющих на метаболизм лекарств).

¶Токсикологические исследования

Буккальный эпителий применяется как биомаркер воздействия токсичных веществ (тяжёлых металлов, пестицидов, табачного дыма). В клетках оценивают уровень микроядер (показатель генотоксичности), апоптоз, повреждение ДНК (метод комет). Также исследуют активность ферментов биотрансформации (например, цитохрома P450).

¶Криминалистика

В судебной медицине буккальный эпителий используется для получения образцов ДНК у подозреваемых, потерпевших и для идентификации неопознанных тел. Забор материала проводится с помощью стерильного ватного тампона со внутренней поверхности щеки.

¶Клиническое значение

¶Заболевания и патологии

Буккальный эпителий может поражаться при ряде заболеваний:

• Лейкоплакия — участки ороговения, которые могут быть предраковым состоянием.
• Красный плоский лишай — хроническое воспалительное заболевание, проявляющееся белыми папулами на слизистой.
• Афтозный стоматит — язвенные поражения эпителия.
• Кандидоз (молочница) — грибковая инфекция, при которой на эпителии образуется белый налёт.
• Вирусные инфекции (герпес, ВПЧ) — вызывают характерные везикулы и папилломы.

¶Трансплантация и регенеративная медицина

Клетки буккального эпителия используются в качестве источника для тканевой инженерии. Из них выращивают эпителиальные трансплантаты для закрытия дефектов слизистой оболочки рта, а также для лечения ожогов роговицы глаза (метод культивирования буккальных эпителиоцитов). В ряде стран разрабатываются методы использования буккального эпителия для восстановления уретры при стриктурах.

¶Методы забора материала

Наиболее распространённый способ получения буккального эпителия — соскоб с внутренней поверхности щеки с помощью специальной щёточки (цитощётка) или шпателя. Процедура безболезненна, длится несколько секунд. Для генетических исследований достаточно 10–20 клеток. Для цитологических исследований требуется большее количество клеток, которые наносят на предметное стекло и фиксируют.

Альтернативные методы: смыв (полоскание рта физиологическим раствором) и биопсия (при подозрении на опухоль).

¶Интересные факты

• Буккальный эпителий человека содержит около 10–15% клеток, которые экспрессируют маркеры стволовых клеток (p63, интегрин альфа-6).
• В клетках буккального эпителия можно обнаружить вирус Эпштейна — Барр у 90% взрослого населения (в латентной форме).
• Исследование микроядер в буккальном эпителии используется Всемирной организацией здравоохранения как один из стандартных биомаркеров для оценки генотоксичности окружающей среды.
• В XIX веке буккальный эпителий впервые был описан как самостоятельный тип ткани немецким гистологом Йозефом фон Герлахом.

¶Источники

• Гистология: учебник / под ред. В. Л. Быкова. — М.: ГЭОТАР-Медиа, 2019.
• Афанасьев Ю. И., Юрина Н. А. Гистология, цитология и эмбриология. — М.: Медицина, 2002.
• Кузнецов С. Л., Мушкамбаров Н. Н. Гистология, цитология и эмбриология. — М.: МИА, 2019.
• Human Oral Mucosa: Development, Structure and Function / C. A. Squier, M. J. Kremer. — Wiley-Blackwell, 2011.
• World Health Organization. Micronucleus assay in buccal epithelial cells: a review of the literature. — Geneva: WHO, 2016.