МАР-тест — оценка антиспермальных антител¶
МАР-тест (MAR — Mixed Antiglobulin Reaction, «реакция смешанного агглютинирования») — лабораторный метод исследования эякулята, определяющий долю сперматозоидов, связанных с антиспермальными антителами (АСА). Метод применяется в рамках расширенной спермограммы и дополняет базовое исследование по рекомендациям Всемирной организации здравоохранения (ВОЗ). По клиническим критериям ВОЗ (5-е издание, 2010), результат считается нормальным, если менее 50 % сперматозоидов покрыты антителами; значение 50 % и выше указывает на иммунологический фактор мужского бесплодия.
¶Антиспермальные антитела: суть явления
Антиспермальные антитела — это иммуноглобулины классов IgA, IgG и IgM, которые атакуют собственные сперматозоиды. В норме сперматозоиды изолированы от иммунной системы гематотестикулярным барьером: клетки Сертоли образуют плотный контактный барьер вокруг канальцев яичка, и иммунные клетки не контактируют со сперматогенезом. При нарушении этого бартера (травма, воспаление, перенесённый орхит, варикоцеле, хирургические вмешательства на яичке) иммунная система распознаёт сперматозоиды как чужеродный антиген и начинает вырабатывать против них антитела.
АСА могут образовываться и в организме женщины — например, при контакте со спермой при нарушениях влагалищной микрофлоры, но чаще речь идёт об аутоиммунном процессе у мужчины.
¶Механизм действия антител
Антиспермальные антитела связываются с антигенами на мембране сперматозоида — прежде всего с акросомальным комплексом и белками хвоста. Это приводит к нескольким последствиям:
- снижение подвижности сперматозоидов (агглютинация — склеивание сперматозоидов между собой);
- нарушение акросомальной реакции, необходимой для проникновения в ооцит;
- затруднение контакта сперматозоида с шеечной слизью;
- повреждение ДНК сперматозоида под действием комплемента.
В итоге даже при нормальных показателях количества и подвижности сперматозоидов оплодотворение может быть затруднено.
¶Показания к назначению
МАР-тест назначают в следующих случаях:
- Бесплодный брак без выявленной причины по базовой спермограмме.
- Низкая подвижность сперматозоидов (астенозооспермия) неясного генеза.
- Агглютинация сперматозоидов в эякуляте.
- Перенесённые воспалительные заболевания органов мочеполовой сферы, травмы яичек, операции (варикоцелеэктомия, биопсия яичка).
- Неудачные попытки ЭКО или неудачная инсеминация.
- Подготовка к экстракорпоральному оплодотворению — для выбора метода: при высоком индексе МАР рекомендуется ИКСИ, а не стандартное ЭКО.
¶Методика проведения
Для исследования используется свежий эякулят, полученный мастурбацией, после периода воздержания 2–7 дней (по рекомендациям ВОЗ). Существует два основных варианта метода:
- MAR-тест с латексными частицами. На предметное стекло наносят каплю эякулята, смешивают с латексными шариками, покрытыми античеловеческим иммуноглобулином. Если сперматозоиды покрыты АСА, латексные частицы связываются с ними. Под микроскопом оценивают долю подвижных сперматозоидов, к которым прикреплены латексные частицы.
- MAR-тест с антителами к иммуноглобулину. Используются моноклональные антитела, меченные флуоресцентными или энзимными метками, что повышает точность.
В лаборатории оценивается минимум 200 сперматозоидов. Результат выражается в процентах сперматозоидов, связанных с АСА.
¶Интерпретация результатов
| Результат | Трактовка |
|---|---|
| Менее 50 % | Клинически незначимый уровень АСА |
| 50 % и выше | Высокий уровень АСА, иммунологическое бесплодие |
| 80–100 % | Тяжёлая иммунологическая форма, практически исключающая естественное оплодотворение |
Важно, что МАР-тест оценивает только подвижные сперматозоиды: антитела визуализируются преимущественно на активно движущихся клетках. Поэтому при тяжёлой астенозооспермии результат может быть недостоверным — в этом случае используют дополнительные методы (прямой и непрямой тест на АСА).
¶Ограничения метода
МАР-тест не входит в базовую спермограмму по ВОЗ и не является обязательным. Метод имеет ряд ограничений:
- субъективность визуальной оценки под микроскопом;
- зависимость от квалификации лаборанта;
- невозможность оценить неактивные сперматозоиды;
- отсутствие единого стандарта реагентов между лабораториями.
Поэтому результат всегда интерпретируется в комплексе с другими показателями спермограммы и клинической картиной.
¶Тактика при положительном результате
При подтверждённом высоком индексе МАР применяются:
- лечение воспалительного процесса в репродуктивных путях (антибактериальная терапия при подтверждённой инфекции);
- иммуносупрессивная терапия кортикостероидами (по показаниям, с осторожностью);
- промывание сперматозоидов перед ЭКО методом суспендирования и центрифугирования в градиенте плотности;
- ИКСИ — интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида в ооцит, наиболее эффективный метод при иммунологическом факторе;
- использование донорской спермы при неэффективности лечения.
ИКСИ позволяет обойти барьер антител, поскольку сперматозоид вводится непосредственно в ооцит, минуя этапы, на которых АСА проявляют своё действие.
¶МАР-тест и другие исследования
МАР-тест не следует путать с тестом на антиспермальные антитела в сыворотке крови или цервикальной слизи. Сывороточные АСА отражают системный иммунный ответ, а МАР-тест показывает непосредственную связь антител со сперматозоидами, что имеет большее клиническое значение. Дополнительно при подозрении на иммунологическое бесплодие могут назначаться посткоитальный тест (проба Шуварского-Симса-Гуннера) и тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов.
Источники:
- Всемирная организация здравоохранения. Руководство по исследованию эякулята и сперматозоидов, 5-е издание (2010).
- Дубинская А. М., Абумалихова Л. А. Андрология: клинические рекомендации. — М.: ГЭОТАР-Медиа.
- Алямовская И. Б., Сухих Г. Т. Мужское бесплодие: современные аспекты диагностики и лечения.
- Практическая андрология (журнал), статьи по иммунологическому фактору мужского бесплодия.